Е. Д. Mytsa, L.Yu. Кокаева, С.Н. Елански
Оомицет Фитофтора инфестанс (Mont) de Bary причинява късна болест, опасна болест по картофите и доматите. Един от основните източници на първичен инокулум P. infestans са дебелостенни почиващи репродуктивни структури - ооспори.
Хибридните ооспори, образувани в резултат на кръстосване на генетично различни родителски щамове, допринасят за увеличаване на генотипното разнообразие в популацията, в резултат на което процесът на адаптация на щамовете към нови сортове и приложени фунгициди се ускорява.
Образуване на ооспори P. infestans в полето е отбелязано в много страни по света: Русия (Smirnov et al., 1999), Норвегия (Hermansen et al., 2002), Швеция (Strömberg et al., 2001), Холандия (Kessel et al., 2002) и други региони. Ооспорите са способни да се задържат в почвата в жизнеспособно състояние повече от 2 години (Bødker et al., 2006) и да причиняват инфекция на растенията след презимуване (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
По-рано беше показано, че листата на растенията от различни нива на картофения храст имат разлики в устойчивостта на късна болест; тя се увеличава от долните листа към горните. Тази тенденция не зависи от възрастта на листата, възрастта на растението или сорта картофи (Vesper et al., 2003). В същото време не успяхме да намерим данни за разликите в интензивността на образуването на ооспори в листата на различни слоеве от картофения храст в литературата. Ако обаче съществуват такива разлики, те трябва да бъдат взети предвид при вземане на проби от листа за анализ на образуването на ооспори и при тълкуване на резултатите, получени от други автори. Целта на тази работа беше да се изследва образуването на ооспори в отделените листа на различни слоеве от картофено растение, поставени при едни и същи условия във влажни камери.
Материали и методи
Използвахме 5 изолата P. infestans различни видове чифтосване, изолирани от засегнатите проби, донесени от Москва, Рязан и Ленинград. От тях бяха избрани 3 двойки щамове от различни видове чифтосване, които дадоха изобилие от ооспори, когато се тестваха в агарова овесена среда.
За тестване използвахме картофени растения без вируси от следните сортове, отглеждани в оранжерия (в торфен субстрат): ранният Сандрин, Зорачка, Уладар, Озирис, средно-ранният Илински, средно-сезонният Янка.
За анализ бяха избрани прости листа от различни нива на картофеното растение. Три листа бяха избрани от долното ниво (4 долни сложни листа), три отгоре (3-4 сложни листа отгоре) и три листа от центъра на храста. Обикновените листа се претеглят, снимат се на координатна хартия (за изчисляване на обема и площта) и след това се поставят с главата надолу върху повърхността на стерилна вода, изсипват се 25 ml в чашките на Петри. След това всеки лист беше заразен с една капка смесена суспензия на зооспорангие изолати А1 и А2 от типа на чифтосване. За три листа, събрани от всяко ниво, беше използван инокулум от три различни двойки изолати. Един лист беше заразен с инокулатна смес от една двойка изолати.
За да се приготви суспензия от зооспорангия, изолати от различни видове чифтосване се отглеждат в агарова овесена среда в продължение на 7 дни, след което зооспорангиите се измиват със стерилна дестилирана вода. Концентрацията на инокулат е 5-7 зооспори в зрителното поле на микроскопа при 80-кратно увеличение. Всеки лист е заразен с една капка смесена суспензия от зооспорангиа изолати А1 и А2 тип чифтосване.
Във всички експерименти са използвани 3 картофени листа за вариант. След инкубация в продължение на 20 дни при 18 ° С, всеки лист се хомогенизира в хаванче с 2 ml дестилирана вода. От получената суспензия бяха взети 3 проби, от които бяха приготвени препарати за микроскопия.
Във всеки вариант бяха изследвани 180 зрителни полета, след което броят на ооспорите беше преизчислен на 1 mm2 листна повърхност. Резултатите от преброяването за всеки вариант бяха осреднени.
За да се изчисли доверителният интервал (μ) за ниво на значимост 0,05, беше използвана следната формула
където s е стандартното отклонение, n е броят на измерванията, t е константата на t-теста за ниво на значимост 0,05. Всички изчисления са извършени в Excel (пакет Microsoft Office).
Резултати и дискусия
Инокулирането на листа, събрани от различни слоеве на картофения храст и поставени при същите условия във влажни камери, разкрива разлики в интензивността на образуването на ооспори. При всички изследвани сортове максималният брой ооспори се е образувал по време на инокулация на листа, събрани от долните и средните нива на храста. Не са открити съществени разлики в образуването на ооспори в долните и средните листа.
Минималният брой ооспори се е образувал в листата на горния слой (фиг. 1).
В листата на долните и средните нива максималният брой ооспори се е образувал при сортовете Сандрин, Илински, Зорачка, Уладар и Озирис. Те са се образували малко по-малко интензивно в листата на сорта Янка. Максималният брой ооспори в листата на горния слой се наблюдава в листата на сорта Уладар, след това Зорачка, Озирис, Янка, Илински, Сандрин отиват в намаляващ ред, но не всички разлики са статистически значими.
Фигура: 1. Образуване на ооспори в листата на различни слоеве от картофения храст. Долните са листата на трите долни нива на храста, горните са 3-4 сложни листа от върха на растението, средните са от средата на храста.
Лентите за грешки показват интервала на доверие за ниво на значимост 0,05.
В полето микроклиматичните условия също допринасят за образуването на ооспори в долните и средните листа на храста: по-висока влажност, намалена слънчева инсолация и дневни температурни колебания (Harrison, 1992). Горещото пръскане води до по-малко пестициди в дъното и центъра на храста. За да се намали образуването на ооспори, трябва да се използват технологии, които позволяват успешно доставяне на фунгициди в долната и средната част на храста. Добри резултати могат да бъдат получени чрез използване на турбулентни въздушни пръскачки и системни фунгициди, които могат да се разпространят в необработените части на храста.
Тази работа беше подкрепена от Руската научна фондация (проект № 14-50-00029).
Статията е публикувана в списание "Защита на картофите" (№ 2, 2015)